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HPLC色譜柱污染問題及實用對策!

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發布時間:
2020/07/22 10:26
保留時間漂移的另一個常見原因是色譜柱污染。HPLC色譜柱是非常有效的吸附性過濾器,它可以過濾并吸附流動相攜帶的任何物質。污染源可以是:流動相本身,流動相容器,連接管、泵、進樣器和儀器密封墊,以及樣品等。通常通過實驗可判斷污染的來源。
樣品中如果存在色譜柱上保留很強的組分,就可 能是使保留時間漂移的潛在根源。這些根源通常是樣品基質。避免色譜柱污染最簡單的方法是防患于未然。通常使用在給定色譜條件下的強溶劑,但并非所有污染物都可以在流動相中溶解。使用保護柱是個非常有效的方法。反沖色譜柱僅是不得已時采用的辦法。
? 流動相組成
流動相組成的緩慢變化也是保留時間漂移的常見原因。如流動相中易揮發組分的揮發及循環使用流動相等。
? 疏水坍塌  
當小孔徑、端基封口良好的反相填料色譜柱使用接近100%的水為流動相時,有時會發生分離突然喪失及被分析物質保留明顯降低或完全不保留的現象,這就是疏水坍塌。此現象是由流動相不浸潤固定相表面而致。挽救的辦法實現用含大量有機組分的流動相浸潤固定相,再用高水含量的流動相進行平衡。色譜柱長期儲存也會發生此現象。使用內嵌極性基團的反相色譜柱(如Waters  SymmetryShield RP色譜柱) 或非端基封口的色譜柱(如Waters  Resolve色譜柱)也可避免發生坍塌。
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